Karloffs großes schauspielerisches und mimisches Talent war fortan von unterschiedlichsten Masken zugedeckt, doch immerhin wurde sein "Monster" wohl zur berühmtesten Maske der Filmgeschichte. Seine gewaltige, markante Stimme durfte sich in den Urlauten des Monsters zwar kaum artikulieren, dennoch zählt Karloffs ebenso grauen- wie mitleiderregende Darstellung des Frankenstein-Geschöpfs zu den ganz großen Darstellerleistungen auf der Leinwand. Nach dem Abebben der Horror-Welle wurde Karloff wieder auf eher unbedeutende Figuren, meist in B-Filmen reduziert, zu den wenigen Highlights seiner späteren Filme zählt Roger Cormans Edgar Allan Poe-Adaption "Der Rabe – Duell der Zauberer"¹) (1963, The Raven) wo Karloff neben Vincent Price als Dr. Scarabus brillierte. Seine Horrorrollen parodierte er glänzend in den Komödien "Abbott and Costello Meet the Killer, Boris Karloff" (1948) und "Abbott & Costello treffen Dr. Jekyll und Mr. Hyde" (1953, Abbott and Costello Meet Dr. Jekyll and Mr. Hyde), eine herrliche Persiflage ist auch Jacques Tourneurs Komödie "Ruhe Sanft GmbH"¹⁾ (1963, The Comedy of Terrors²⁾, in der Karloff neben zwei anderen Großen des Horror-Genres, Vincent Price und Peter Lorre, zu sehen ist. Karloff selbst bezeichnete seinen letzten Film, Peter Bogdanovichs "Bewegliche Ziele"¹⁾ (1968, Targets), wo er als greiser Horrorstar sich praktisch selbst spielte, als eine seiner besten Arbeiten für das Kino überhaupt.  
Dass Karloff als Schauspieler mehr zu bieten hatte, als das Ungeheuer oder sonstige monströse Figuren zu spielen, bewies er als exzellenter Rezitator und Bühnendarsteller. Im englischen Sprachraum verehrt man ihn noch heute als Kenner englischer Lyrik und als Experte für Kinderbücher. Seine Gute-Nacht-Geschichten im Radio waren bei Kindern und Erwachsenen gleichermaßen beliebt. Als Synchronsprecher lieh er unter anderem in dem Zeichentrickfilm "How the Grinch Stole Christmas" (1966, Die Gestohlenen Weihnachtsgeschenke) der Hauptfigur seine Stimme und trat als Erzähler auf.
Karloff war Monster und Märchenerzähler, Frankensteins Geschöpf und der liebenswerte alte Herr, der zeitlebens unter dieser Typisierung litt. Einer der wenigen Filme, mit dem ihm der Ausbruch aus dem Klischee gelang, war die Rolle des der religiösen Eiferers Sanders in John Fords Kriegsabenteuer "Die letzte Patrouille"¹⁾ (1934, The Lost Patrol) sowie die des Antisemiten Graf Ledrantz in dem Oscar-prämierten Biopic "Die Rothschilds"¹⁾ (1934, The House of Rothschilds).
 
Während seiner Hollywood-Karriere stand der Schauspieler immer wieder auf der Bühne, seit Anfang der 1940er Jahre sah man ihn am Broadway in rund 1.400 Vorstellungen mit der Paraderolle des gesuchten Massenmörders Jonathan Brewster in der schwarzen Komödie "Arsen und Spitzenhäubchen" (Arsenic and Old Lace) von Joseph Kesselring¹⁾ (1902 – 1967), fungierte auch als Produzent und Geldgeber für die Produktion. Für die vorzügliche Kinofassung¹⁾ (1944) von Regisseur Frank Capra stand der Schauspieler wegen seiner Theaterverpflichtungen leider nicht zur Verfügung, doch Raymond Massey¹⁾ (1896 – 1983) war in Karloffs Rolle bzw. Maske ausgezeichnet und in der Originalfassung reagierte er an einer Stelle extrem beleidigt auf die Feststellung, er sehe wie Boris Karloff aus. In der deutschen Synchronisation wurde daraus "Frankensteins Monster" und die Anspielung bzw. der Gag ging verloren.
Ende der 1940er, Anfang der 1950er Jahre war Boris Karloff sowohl als "böser" Kapitän Hook als auch "guter" Mr. Darling in der Bühnenfassung von "Peter Pan"¹⁾ zu sehen. Die Inszenierung zu Gunsten des Kinderkrankenhauses "The Hospital for Sick Children" (Peter Pan's Hospital) in Karloffs Geburtsstadt London brachte es auf mehr als 300 Vorstellungen.⁴⁾ Etwa zu dieser Zeit begann der Künstler auch seine Fernsehkarriere, indem er drei Monate lang die eigene Show "Starring Boris Karloff" moderierte. 1954/55 sah man ihn in der seit 1951 beliebten Quiz-Sendung "Down You Go", mit Gastauftritten in TV-Shows und Serien blieb er auf dem Bildschirm präsent. Nach den Dreharbeiten seiner letzten Filme, unter anderem Peter Bogdanovichs "Bewegliche Ziele"¹⁾  (1968, Targets), verließ Karloff die USA und ließ sich endgültig in seinem Londoner Haus im Stadtteil Kensington bzw. in seinem Landhaus in Hampshire nieder. Dort lebte der Schauspieler, der im Privatleben als vornehm, ruhig, höflich und "sophisticated" galt bis zu seinem Tod zurückgezogen, widmete sich – soweit es seine angeschlagene Gesundheit zuließ – seinen Hobbys wie der Gartenarbeit, ging zum Cricket und züchtete Hunde. Außerdem engagierte er sich für soziale Belange, unterstützte beispielsweise hilfsbedürftige Kinder und gemeinnützige Organisationen.

Es war ihm nur wenig Zeit vergönnt, den Ruhestand mit seiner letzten Ehefrau, auszukosten, Boris Karloff starb am 2. Februar 1969 im Alter von 81 Jahren in einem Krankenhaus in Midhurst (Sussex) an den Folgen einer Lungenentzündung. Beigesetzt wurde er im "Guildford Crematorium" in Godalming (Surrey). Die Bestattung erfolgte auf ausdrücklichen Wunsch des Schauspielers in einem schlichten Rahmen sowie ohne Beteiligung der Öffentlichkeit.
Seine erste, 1910 geschlossene Ehe mit der aus Neuseeland stammenden Grace Harding wurde nach nur drei Jahren geschieden, ebenfalls von kurzer Dauer war die 1915 geschlossene Verbindung mit der kanadischen Bühnenschauspielerin Olive  Wilton. Nach den Ehen mit Montana Laurena Williams (Heirat 1920) und Helene Vivian Soule (1924 – 1928) ehelichte Karloff 1928 die Mitarbeiterin der Stadtbibliothek von Los Angeles, Dorothy Stine, welche ihm am 23. November 1938 Tochter Sarah Jane schenkte. Die Ehe wurde Anfang 1946 geschieden, noch im gleichen Jahr fand am 11. April 1946 die Hochzeit mit der 16 Jahre jüngeren Engländerin Evelyn Hope Helmore statt, die bis zu Karloffs Tod an seiner Seite war.
 
Obwohl der Schauspieler in seinem mehr als 50 Jahre währenden Berufsleben in den unterschiedlichsten Rollen in Film und Fernsehen sowie auf der Bühne zu sehen war, wird er bis heute in der öffentlichen Wahrnehmung vor allem in Europa vornehmlich auf "Frankensteins Monster" reduziert. Hinter dieser Figur, die er nur drei Mal im Film verkörperte, verschwand die menschliche Gestalt des Boris Karloff alias William Henry Pratt nahezu vollständig. Der kantige Monsterkopf mit dem traurig-leeren Blick wurde zu einer Ikone des surrealen Horrors und macht Karloff unsterblich. Bereits 1938 war die Monstermaske zum Symbol der großen Surrealismus-Ausstellung in Paris geworden.⁴⁾